|   別稱

|   Flag-tag 簡介

FLAG 標簽，或 FLAG 八肽，或 FLAG 表位，是一種多肽蛋白質標簽，可以用重組 DNA 技術添加到蛋白質中，其序列圖案為 DYKDDDDK（其中 D=天冬氨酸，Y=酪氨酸，K=賴氨酸）。它是最特異的標簽之一，是一種通用種 屬工抗原，已經開發出特異的、高親和力的單克隆抗體，因此可用于親和層析法的蛋白質純化，也可用于定位活細胞內的蛋白質。它已被用于分離重組的、過量表達的蛋白和宿主生物體表達的野生型蛋白。它還可用于分離具有多個亞單位的蛋白質復合物，因為其溫和的純化過程往往不會破壞這種復合物。它已被用于獲得足夠純度和質量的蛋白質，以通過 X 射線晶體學進行三維結構測定。FLAG 標簽可用于許多需要抗體識別的不同檢測中。如果沒有針對某一特定蛋白的抗體，在蛋白上添加 FLAG 標記，就可以用針對 FLAG序列的抗體來研究該蛋白。例如通過免疫熒光、免疫沉淀或通過 SDS PAGE蛋白電泳和 Western 印跡檢測進行細胞定位研究。從 N 端到 C 端的 FLAG標簽的肽序列是。DYKDDDDK（1012Da）。此外，它還可以串聯使用，常見的是 3xFLAG 肽。DYKDHD-G-DYKDHD-I-DYKDDDDK（最后一個標簽編碼一個腸激酶裂解位點）。它可以與蛋白質的 C 端或 N 端融合，或插入到蛋白質內。一些市售的抗體（如 M1/4E11）只有在 N 端出現時才能識別該表位。然而，其他可用的抗體（如 M2）則對位置不敏感。FLAG標簽中的酪氨酸殘基可以被硫酸化，這可能會影響抗體對 FLAG 表位的識別。FLAG 標簽可以與其他親和力標簽一起使用，例如多組氨酸標簽（His 標簽）、HA標簽或 myc 標簽。

|   特異性

可檢測樣本中的Flag-tag ，且與其類似物無明顯交叉反應。

|   典型數據及參考曲線

由于實驗操作條件的不同（ 如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考，實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。

|   重復性

板內變異系數小于10%，板間變異系數小于10%

|   回收率

在選取的健康組織勻漿、細胞裂解液中加入3個不同濃度水平的Flag-tag ，計算回收率

|   線性稀釋

分別在選取的4份健康組織勻漿、細胞裂解液中加入高濃度Flag-tag ，在標準曲線動力學范圍內進行稀釋，評估線性。

注：ELISA試劑盒檢測范圍等數據，因檢測樣本 的不同而調整，實際數據以隨貨說明書為準。