| 別稱
PPD; HPPD; ;HPD;4HPPD; GLOD3; Glyoxalase Domain Containing 3; 4-hydroxyphenylpyruvic acid oxidase;α-ketoisocaproate dioxygenase (KIC dioxygenase)
| HPD 簡介
羥基苯丙酮酸雙加氧酶(HPD),也稱為α-酮異己酸雙加氧酶(KIC雙加氧酶)或HPPD,是一種含Fe(II)的非血紅素加氧酶,可催化酪氨酸分解代謝中的第二個反應-4-羥基苯基丙酮酸轉化為尿黑酸。它還催化苯丙酮酸轉化為 2-羥基苯乙酸酯和α-酮異己酸轉化為β-羥基β-甲基丁酸酯。HPPD是一種幾乎存在于所有有氧生命形式中的酶。在幾乎所有好氧生物中,它負責將4-羥基苯基丙酮酸轉化為均質酸鹽。這種轉化是將L-酪氨酸分解成乙酰乙酸和富馬酸鹽的眾多步驟之一。雖然這個循環的整體產物被用來產生能量,但植物和高階真核生物利用HPPD還有更重要的原因。在真核生物中,它用于調節血液酪氨酸水平,植物利用這種酶來幫助產生輔助因子塑醌和生育酚,這對植物的生存至關重要。它可能與已知最古老的遺傳性代謝紊亂之一(稱為酒精性尿癥)有關,后者是由血液中高水平的均質引起的。它也與III型酪氨酸血癥直接相關。
| 特異性
可檢測樣本中大鼠的HPD,且與其類似物無明顯交叉反應。
| 典型數據及參考曲線
由于實驗操作條件的不同( 如操作者、移液技術、洗板技術和穩定條件等),標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
| 濃度(ng/mL) |
200 |
100 |
50 |
25 |
12.5 |
6.25 |
3.12 |
0 |
| OD值 |
2.52 |
1.96 |
1.38 |
0.97 |
0.55 |
0.31 |
0.19 |
0.08 |
| 校正OD值 |
2.44 |
1.88 |
1.3 |
0.88 |
0.47 |
0.23 |
0.11 |
- |
| 重復性
板內變異系數小于10%,板間變異系數小于10%
| 回收率
在選取的健康大鼠血清、血漿、細胞培養上清中加入3個不同濃度水平的大鼠HPD,計算回收率
| 樣本類型 |
范圍 |
平均回收率 |
| 血清(n=8) |
82-101 |
96 |
| 血漿(n=8) |
92-105 |
102 |
| 細胞培養上清(n=8) |
96-108 |
103 |
| 線性稀釋
分別在選取的4份健康大鼠血清、血漿、細胞培養上清中加入高濃度大鼠HPD,在標準曲線動力學范圍內進行稀釋,評估線性。
| 稀釋比例 |
回收率(%) |
血清 |
血漿 |
細胞培養上清 |
| 1:2 |
范圍(%) |
84-95 |
86-96 |
90-110 |
| 平均回收率(%) |
91 |
93 |
96 |
| 1:4 |
范圍(%) |
89-103 |
87-108 |
105-115 |
| 平均回收率(%) |
94 |
98 |
109 |
注:ELISA試劑盒檢測范圍等數據,因檢測樣本 的不同而調整,實際數據以隨貨說明書為準。
